PCR实验室为什么要求严格分区
时间:2022-07-17 16:00:00 作者:网络 分类:行业资讯 浏览:30次

  PCR实验室常见的三个区域是指:

  1.试剂配制区:PCR反应系统配制区。

  2.标本处理区:包括扩增模板的制备,即我们经常提取DNA的地方;

  3.PCR扩增及产品分析区:PCR扩增区,也是扩增产品进行凝胶电泳分析的区域。

  此外,如果PCR扩增区与产品分析区再次分离,则为四区隔离。

  四区隔离的主要目的是防止每个PCR区域之间的气溶胶流动——最好的方法是将每个区域分开一栋建筑,这绝对是最好的隔离措施,但操作绝对不现实,因此有一种方法可以为不同区域设置正负压:

  试剂配制区(一区):最干净的区域,保持微正压,使外界空气无法进入隔离污染源。阴性模板应加入PCR管并盖,严禁在该区域打开。存放带DNA模板的离心管;

  DNA模板添加区(二区):保持微负压,保证内部空气不泄漏,避免阳性模板气溶胶污染外部环境。

  扩增及PCR产品分析区(三区):保持微负压,防止内部空气泄漏,避免扩增产品气溶胶污染外部环境。

  操作时遵循一区→二区→三区单向,不可逆转。

  对于用于科研的PCR实验室,如果不能满足三区严格隔离的要求,至少应隔离两区:正压区和负压区。正压区实施一区功能,负压区实施二区、三区功能。

  最忌讳、最可怕的是在正压区实施三区功能。关键是PCR实验室不同区域之间的空气是否相互循环。

  如果有问题,我们的实验室没有正负压区分,或者全负压,全正压怎么办?然后我们的建议是:不要害怕麻烦,找一个远离三个区域的实验室(通常打开PCR扩展产品的盖子区域,如电泳区)作为PCRI区域,可以节省更多的后续麻烦。

  由于PCR三区隔离的目的是阻断气溶胶的交流,请注意以下细节,思考气溶胶来自哪里:

  1.各区域应配备专用移液器,不得交叉混用。

  2.各区域应配备专用移液器吸头,不得交叉混用。

  3.如果条件允许,在PCRII区工作后,需要更换实验服、一次性鞋套、帽子、手套。

  4.在PCRI区域。PCRI区备滤芯吸头。

  以上就是关于PCR实验室要求严格分区的相关介绍,希望能帮助大家。