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pcr实验室环境测评怎么做?
1、采集检测样本,如咽拭子或肛拭子。检测样本通过带互锁装置及紫外线杀毒功能的传递窗进入到P3实验室,可有效避免传递样本时污染物的流通,不污染实验室外环境。
2、样本在水浴箱经半小时56摄氏高温灭活,使病毒蛋白丧失生理活性,不再具备感染、发病和繁育的能力。
3、在标本采集处理间,实验员取得灭活后的样本时,首先进行震荡,接着开盖加样。样本在开盖转移的过程中,病毒很容易曝露在实验室的空气中,与实验员基本上是零距离接触。
4、人工核酸提取流程繁杂,虽可以使用仪器辅助,但由于比对的需要,往往要加以人工操作,这需要反复进行离心、加试剂、洗涤等10多个步骤。
5、提取的核酸送至核酸检测室内,就需要上仪器设备了。把提取的核酸加入到扩增试剂中,通过荧光PCR仪进行RT PCR反应,将提取的核酸逆转录成DNA,再以DNA为模版,对特定位点进行扩增,利用不同的温度进行变性、退火和延伸,对每个循环采集荧光值,45个循环后绘制荧光曲线,用时约110分钟,实验员根据荧光曲线分析判断结果的阴性和阳性。
三重pcr建立原则?
一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定。
三重PCR就是用了三对PCR引物。
三重pcr实验室建立原则:
1、地面材料
PCR实验室装修的地面材料,建议选择PVC卷材地上或自流坪,整体性好,便于进行打扫,耐腐蚀。
2、主体装修设计
PCR实验室主体装修应当选择彩钢板、铝合金型材。结构结实,线条简明,美观大方,密封性好。
3、机械连锁不锈钢传递窗
PCR实验室内的试剂和标本通过机械连锁不锈钢传递窗传递,确保试剂和标本在传递过程中不受污染。
4、消毒
灯具要选用净化灯具,便于清洗、不积尘。在三个试验区和缓冲区及传送窗内部装置紫外灯,供消毒用。
5、标准的三区分隔和气压调理
将PCR实验室建设按照实验过程分成试剂预备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的试验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。
pcr实验室过滤网更换要求?
(1)高效过滤器更换条件:气流速降到ZUI低限度,即使更换初效、中效空气过滤器后,气流速度仍然不能增大;高效过滤器的阻力达到初阻力的两倍;高效过滤器出现无法修补的渗漏;建议至少一年更换一次(即便使用频率较低ZUI多两年就需要更换一次)。
(2)中效过滤器的检查与清洁:每一个风箱设置有袋式中效过滤网,用其来对新风、回风进一步过滤除尘,建议每3个月检查、更换一次,或视情况增、减检查或更换频次更换时应小心,勿将过滤袋扎破、框磕碰变形,以免影响过滤效果。
(3)初效过滤器检查与清洁:每一台空调机组在其新风管入口的附近设有初效过滤网,其主要用来防止新风带入的灰尘,蚊虫等进入空调空气系统。故对其需进行检查、更换,建议每45天检查、更换一次,或视情况加大或减少检查更换频次。
pcr室最适温度?
PCR实验室对温度没有严格要求,从实验室人性化考虑,人体温度在环境温度(18℃~25℃,相对湿度:50%),人体感觉比较舒适。因此,PCR实验室应通过各种措施,保证环境温度、湿度控制在一定范围之内。
PCR实验室又称为基因扩增实验室,利用分子生物学技术,通过放大DNA片段,也可以看做是生物体外的特殊DNA复制。利用基因追踪系统,掌握人体内部的病毒含量,此种试验的精确度可达到纳米级别。
PCR实验室通风系统流程是什么?
1.采用:非单向流送风方式划分
(1)上送下回式
(2)上送下侧回式
(3)测送下回式
(4)上送上回式
2.设计事项:PCR实验室采用上送下回式
(1)上部送风:高效送风口进入房间
(2)下部回风:房间对称分布排风柱下部的排风口排风
3.新风路径:
处理机组—经过粗效、中效、亚高效、表冷(热)段、喷淋段(加湿)到洁净室
4.夏季制冷量要求
(1)设计事项:不要有回风状态,此次统称为全新风系统
(2)夏季室内温度可以控制在26℃,湿度控制在50% ;
5.冬季制热量计算
设计事项:洁净区不能采用散热器
PCR实验室冬季通风方式:全面通风