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pcr实验室环境测评怎么做?
1、采集检测样本,如咽拭子或肛拭子。检测样本通过带互锁装置及紫外线杀毒功能的传递窗进入到P3实验室,可有效避免传递样本时污染物的流通,不污染实验室外环境。
2、样本在水浴箱经半小时56摄氏高温灭活,使病毒蛋白丧失生理活性,不再具备感染、发病和繁育的能力。
3、在标本采集处理间,实验员取得灭活后的样本时,首先进行震荡,接着开盖加样。样本在开盖转移的过程中,病毒很容易曝露在实验室的空气中,与实验员基本上是零距离接触。
4、人工核酸提取流程繁杂,虽可以使用仪器辅助,但由于比对的需要,往往要加以人工操作,这需要反复进行离心、加试剂、洗涤等10多个步骤。
5、提取的核酸送至核酸检测室内,就需要上仪器设备了。把提取的核酸加入到扩增试剂中,通过荧光PCR仪进行RT PCR反应,将提取的核酸逆转录成DNA,再以DNA为模版,对特定位点进行扩增,利用不同的温度进行变性、退火和延伸,对每个循环采集荧光值,45个循环后绘制荧光曲线,用时约110分钟,实验员根据荧光曲线分析判断结果的阴性和阳性。
pcr实验室门尺寸要求?
各实验室缓冲间的面积一般为1300*(1300或1500)mm为宜,并且缓冲间的面积不能大于实验室房间面积的1/8。
在做平面设计的时候,首先要考虑的因素是就是“安全”,实验室是最易发生爆炸、火灾、毒气泄露等的场所。我们在做平面设计的时候,应尽量地要保持实验室的通风流畅、逃生通道畅通。根据国际人体工程学的标准。我们做如下的划分以供参照:
实验台与实验台通道划分标准(通道间隔用L表示)
L>500mm时,一边可站人操作;
L>800mm时,一边可坐人操作;
L>1200mm时,一边可坐人,一边可站人,中间不可过人;
L>1500mm时,两边可坐人,中间可过人;
L>1800mm时,两边可坐人,中间可过人可过仪器
天平台、仪器台不宜离墙太近,离墙400mm为宜。为了在工作发生危险时易于疏散,实验台间的过道应全部通向走廊。另:实验室建筑层高宜为3.7米-4.0米为宜,净高宜为2.7米-2.8米,有洁净度、压力梯度、恒温恒湿等特殊要求的实验室净高宜为2.5米-2.7米(不包括吊顶);实验室走廊净宽宜为2.5米-3.0米.普通实验室双门宽以1.1米-1.5米(不对称对开门)为宜,单门宽以0.8米-0.9米为宜。
pcr实验室温湿度国家建设标准?
PCR实验室要求温度18~26℃,相对湿度30%~70%。uPCR实验室并没有严格的净化要求,但是为了避免各个实验区域间交叉感染的可能性,通风方式应为机械通风,不应自然通风,且不宜使用循环风。同时要严格控制送、排风比例以保证各试验区的压力要求。
PCR实验室的空气流向应按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区进行,防止扩增的产物顺空气气流进入扩增前的区域。
可选择负压排风装置,核心区域相对于相邻区域最小压不小于-10Pa。也可通过安装排气扇或者其他方式实现。
pcr实验室各房间压差是多少?
根据PCR操作流程方向,试剂准备,标准制备,扩增区,产物分析区。
相对压差也应从试剂准备至产物分析方向由高到低的过程。
不过在实际的使用调剂过程中我们会遇到缓冲的气压很难调到设定值,若扩增和产物缓冲区的—5~—10Pa,在调试过程中会出现压差不平衡的问题,比如洁走廊往缓冲方向流入缓冲就是小负压室,缓冲再被动流入负压内室就应变为正压,从而缓冲间排风大于送风量,也就是送风设置为关闭状态后基本可以实现负压的设定值,因此关闭送风维持负压状态是不可行的。其实我们只要了解PCR关键性能后也可以取另外的方式来实现气流合理性的控制,比如PCR缓冲间理解为第二气阀室(室内与缓冲间是两层隔离屏障,洁净走廊对外是一层屏障),所以缓冲间的设置正压值是很有必要也是符合使用标准的
pcr实验室污染处理方案?
1.停止所有实验活动,查看当天所有的试验结果,发现只有一个实验受到了污染。
2.清理试剂准备区、核样本制备区和扩增区所有开封的试剂耗材;
3.离心管架、试管架等可重复使用的物品浸泡到84消毒液中过夜,第二天用清水清洗后晾干使用;
4.对移液器内外表面、核酸提取仪内部先用酒精擦拭后,再用核酸去除剂擦拭,同时启用备用的移液器;
5.对各区的生物安全柜、洁净工作台和实验台面先用酒精擦拭后,再用核酸去除剂擦拭;
6.对实验室地面用84消毒液进行清洁;
7.开窗通风。
pcr科室做什么?
PCR科室又称为基因扩增科室,利用分子生物学技术,通过放大DNA片段,也可以看作是生物体外的特殊DNA复制。
利用基因追踪系统,掌握人体内部的病毒含量,此种试验的精确度可达到纳米级别。
目前,国内的二级医院基本上都在积极开展基因扩增检查实验室项目,PCR实验室的设计与建设越来越受到医学界的重视。
pcr实验室个人三级防护流程?
1. 戴一次性手套,若不小心溅上反应液,立即更换手套;
2. 使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染;
3. 避免反应液飞溅,打开反应管时为避免此种情况,开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面;
4. 操作多份样品时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好,然后分装,这样即可以减少操作,避免污染,又可以增加反应的精确度;
5. 最后加入反应模板,加入后盖紧反应管;
6. 操作时设立阴阳性对照和空白对照,即可验证PCR反应的可靠性,又可以协助判断扩增系统的可信性;
7. 尽可能用可替换或可高压处理的加样器,由于加样器最容易受产物气溶胶或标本DNA的污染,最好使用可替换或高压处理的加样器。如没有这种特殊的加样器,至少PCR操作过程中加样器应该专用,不能交叉使用,尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个区;
8. 重复实验,验证结果,慎下结论。