本文目录

• 不属于实验室一级防护屏障有哪些？
• pc r试验时必须设置几个区域？
• pcr标本管理基本要求？
• 三重pcr建立原则？
• pcr检测优缺点？
• PCR污染问题怎么监测和预防？
• pcr科室做什么？
• PCR实验室通风系统流程是什么？

不属于实验室一级防护屏障有哪些？

实验室的一级防护屏障是指直接操作生物性、化学性或物理性危险因子的场所，采取把危险因子隔离在一定空间内的措施，是危险因子和操作者之间的隔离，主要由安全设备和个体防护装备构成如：手套、口罩、护目镜、防护服等。缓冲间、空气净化系统等不属于防护屏障。

pc r试验时必须设置几个区域？

标准PCR实验室为四区，即试剂准备区、标本处理区、扩增区、产物分析区。

若面积不足，二区、三区分配空间可适当扩大，台面及配套仪器放以实际情况自行设定。

建议通道及实验室间墙都采用铝槊或铝合金加玻璃，采用推门,这样可达到美观、经济、采光好、占地少的优点。

pcr标本管理基本要求？

标准的PCR实验室 标本制备区 仪器设备主要应有生物安全柜（最好为B2, 可避免提取核酸在柜内反复循环，造成标本间交叉“污染”，出现假阳性结果。此外还应配备加样器、台式高速离心机（冷冻及常温）、台式低速离心机、恒温设备（水浴和/或干浴仪）、冰箱、混匀器和可移动紫外灯等。

标准的PCR实验室 产物分析区： 本区所使用的仪器设备可能有加样器、电泳仪（槽）、电转印仪、杂交炉或杂交箱、水浴箱、DNA测序仪、酶标仪和洗板机等。 在理想情况下，PCR实验室试剂准备、标本制备、扩增三个区域可设置缓冲间。在缓冲间内，可设置正压，使室内空气不流向室外，室外空气不流向室内。

三重pcr建立原则？

一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定。

三重PCR就是用了三对PCR引物。

三重pcr实验室建立原则：

?1、地面材料

PCR实验室装修的地面材料，建议选择PVC卷材地上或自流坪，整体性好，便于进行打扫，耐腐蚀。

2、主体装修设计

PCR实验室主体装修应当选择彩钢板、铝合金型材。结构结实，线条简明，美观大方，密封性好。

3、机械连锁不锈钢传递窗

PCR实验室内的试剂和标本通过机械连锁不锈钢传递窗传递，确保试剂和标本在传递过程中不受污染。

4、消毒

灯具要选用净化灯具，便于清洗、不积尘。在三个试验区和缓冲区及传送窗内部装置紫外灯，供消毒用。

5、标准的三区分隔和气压调理

将PCR实验室建设按照实验过程分成试剂预备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的试验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。

pcr检测优缺点？

PCR检测技术具有敏感、特异、快速和简单等优势，特别是荧光定量PCR技术的普及，为微生物检验提供了非常有用的检测工具。PCR技术的不足:应用封闭的检测，不能显示扩增产物的大小；实验成本比较高，试剂盒种类有限；检测光源的局限性，限制了PCR的应用能力。

PCR污染问题怎么监测和预防？

一、污染监测

一个好的PCR实验室，必须要时刻注意污染的监测，考虑是否受到污染，如有污染，是何原因造成的。通过有效地监测，采取正确的相应措施，防止或消除污染。

对照试验是监测PCR污染的重要手段。

1、阴性对照：阴性对照是每次PCR实验都必须做的。它包括了标本对照与试剂对照，通过对照确认样本和试剂是否受到感染。

2、阳性对照：它是PCR 反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。阳性对照要选择扩增度中等、重复性好、经鉴定是该产物的标本。但阳性对照其对检测或扩增样品污染的可能性很大。因而当某一PCR试剂已经使用稳定，检验人员完全掌握时，在之后的实验中应尽可能免设阳性对照。来减小污染概率。

3、选择不同区域的引物进行PCR扩增。

4、重复性试验。

二、防止污染的方法

1、合理分隔实验室：将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增以及PCR产物的鉴定等步骤进行分区或者分室，尤其要将样本处理和PCR产物的鉴定与其它步骤严格分开。 理想的分区为，标本处理区、PCR反应液制备区、PCR循环扩增区、PCR产物鉴定区。

2、PCR试剂要做好预混和分装：所有的PCR试剂都应进行小量分装，PCR反应液应尽可能预先配制好，然后再小量分装，在-20℃下保存，以减少重复加样次数，从而避免污染机会。另外，PCR试剂、PCR反应液应当与样品及PCR产物分开保存，不可放于同一冰盒或冰箱。

3、吸样枪污染防护：吸样枪是一个非常容易发生污染的设备。如操作时不慎将样品或模板核酸吸入枪内或粘在枪头上，将会成为一个严重的污染源，因而使用吸样枪时要格外小心，吸样要慢，并尽量一次性完成，忌多次抽吸，避免发生交叉污染或气溶胶污染。

4、减少PCR循环次数：以PCR产物达到检测水平为宜。

5、防止操作人员污染：使用一次性手套、吸头、小离心管。

pcr科室做什么？

PCR科室又称为基因扩增科室，利用分子生物学技术，通过放大DNA片段，也可以看作是生物体外的特殊DNA复制。

利用基因追踪系统，掌握人体内部的病毒含量，此种试验的精确度可达到纳米级别。

目前，国内的二级医院基本上都在积极开展基因扩增检查实验室项目，PCR实验室的设计与建设越来越受到医学界的重视。

PCR实验室通风系统流程是什么？

四、PCR实验室建设通风系统流程

1.采用：非单向流送风方式划分

（1）上送下回式

（2）上送下侧回式

（3）测送下回式

（4）上送上回式

2.设计事项：PCR实验室采用上送下回式

（1）上部送风：高效送风口进入房间

（2）下部回风：房间对称分布排风柱下部的排风口排风

3.新风路径：

处理机组—经过粗效、中效、亚高效、表冷（热）段、喷淋段（加湿）到洁净室

4.夏季制冷量要求

（1）设计事项：不要有回风状态，此次统称为全新风系统

（2）夏季室内温度可以控制在26℃，湿度控制在50% ;

5.冬季制热量计算

设计事项：洁净区不能采用散热器

PCR实验室冬季通风方式：全面通风